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原位杂交仪中的SPR亲和力测定服务

2020-11-20 09:50:18

表面等离子体共振 (SPR)亲和力测定是一种基于光学的无标记检测技术,用于实时检测两个或多个分子之间的分子互作。SPR亲和力测定具有高通量、高灵活性、高灵敏度的特点,可以用于早期的药物研发以及临床前药物筛选。比如:筛选小分子药物或多肽(酶或抗体等)具有强大的优势能够快速、精准地筛选出候选药物分子为后续研究节省成本。

佰泉生物基于Biacore平台为客户提供准确、快速的亲和力测定服务。表面等离子体共振 (SPR)亲和力测定是一种基于光学的无标记检测技术,用于实时检测两个或多个分子之间的分子互作。SPR亲和力测定的平台吞吐量、灵活性和灵敏度使研究人员有可能在任何结合中研究,包括:抗原抗体亲和力检测,蛋白与小分子多肽亲和力检测,蛋白与小分子药物的亲和力检测等。可以研究范围广泛的分子,从离子、片段和小分子到蛋白质和病毒。佰泉生物的原位杂交仪技术专家基于SPR亲和力测定技术,在项目开始前为客户提供精准、有效的技术咨询服务,为客户提供1-2周的快速亲和力检测周期,为客户提供好的、有效的亲和力测定数据,为客户的实验项目提供强有力的保障。


原位杂交仪厂家

SPR亲和力检测是一种通过传感器芯片跟踪信号变化来检测分子相互作用的方法。SPR信号通过折射率变化呈现,它指的是响应单位 (RU) 大约相当于1pg/mm2的蛋白质表面浓度。在两个分子之间的相互作用过程中,随时间绘制SPR信号会产生传感图,该图可以实时可视(图 1)。一般结合反应包括三个阶段:结合、平衡和解离;将这些传感图数据与数学模型拟合,科学家们可以计算关联 (Ka) 和解离 (Kd) 速率常数,并确定结合亲和力(KD)。与基于平衡点测量抗体结合亲和力的等温量热法 (ITC) 不同,SPR可以获得完整的动力学参数来评估结合和解离的所有影响以及抗体亲和力。


在抗体亲和力测量中,待分析的抗体首先被固定在传感器芯片表面的高亲和力抗IgG 抗体捕获。然后将一系列浓度的抗原依次注射到整个表面。根据传感图曲线,人们可以根据动力学参数对抗体进行排序,并选择具有特性的单克隆抗体。与紧密结合抗体的发现相比,特定区域(表位)的鉴定在药物发现中更有前景,因为通过标准的蛋白工程方法可以使结合亲和力成熟。因此,基于涉及两种结合反应的二价分析物模型,我们能够提供分析来鉴定与两种不同抗原表位结合的抗体。首先将通用抗体(如兔抗小鼠免疫球蛋白)共价连接到芯片表面,然后抗体被先前连接的通用抗体捕获。不饱和位点被封闭后,注射的抗原将与抗体结合,形成Ab-Ag复合物。随后施用于评估结合亲和力的第二单克隆抗体,如果第二抗体结合不同的单独表位,将观察到特有的传感图曲线。

应用范围:

我们提供通过SPR分析研究的生物分子相互作用的荧光原位杂交仪服务。


通过SPR研究各种生物实体,包括小分子 (<100 Da)、蛋白质、核酸、脂质、细菌、病毒和全细胞。大多数已发表的SPR研究涉及蛋白质-蛋白质相互作用,其中抗体-抗原相互作用代表了一个主要方向。我们提供高灵敏度的仪器和实验方案,帮助客户进行小分子、脂质和核酸的研究。蛋白质与较大实体(如全细胞和一些细菌和病毒)的相互作用受到渐逝波指数衰减的限制。在实践中,可以有效地研究这些大分子,但获得的信息可能仅限于定性或半定量(例如,相对排序)数据。


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